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本制品是在粪便RNA提取试剂盒基础上开发的柱式粪便RNA提取试剂盒，得到的RNA可直接用于RT-PCR、Northern杂交、cDNA合成等实验。

由于粪便中有机质含量丰富，对RT-PCR等后续反应有极大的抑制作用，所以从粪便中提取高纯度的RNA一直是十分棘手的问题。

• 操作比非柱式法更加简单快速，处理一个样品只需要约十几分钟。
  
• 去污染效果好，RNA纯度更高，平均OD260/280一般都在2.0左右。

• 称取0.5～1g粪便放入到含液氮的研钵中，迅速将冻成固体的粪便研磨成粉末后。
  
• 将粉末转移到5～15mL的塑料离心管中（不能使用玻璃离心管），加入1mL 65℃预热的粪便RNA纯化溶液A，立即剧烈振荡20秒，充分混匀。
  
• 将匀浆物转移至干净的1.5mL塑料离心管中。
  
• 在离心管中加入0.3mL的粪便RNA纯化溶液B（溶液B用前需要摇匀，呈浑浊状）和0.2mL自备氯仿，在振荡器上振荡30秒混匀，此时溶液呈均匀的乳浊状。振荡器振荡时必须使管底溶液震荡起来。
  
• 室温13000g离心3分钟，两相间将有约5-10毫米厚的细胞破碎物。
  
• 将上清液(约0.6mL)转移到另一干净的1.5mL塑料离心管中，下层有机相和中间层含有DNA、蛋白质和其他杂质，避免触及或吸取。最好留下100μL上清液不取。
  
• 加入等体积的粪便RNA纯化溶液C，充分颠倒混匀。如果有沉淀产生，千万不要去掉沉淀，一定要把所有的混合物上柱。
  
• 将一半的溶液（如果有沉淀，则先混匀）转移到离心吸附柱中，13000g室温离心半分钟，弃穿透液。
  
• 将剩下的一半溶液（如果有沉淀，则先混匀）转移到同一离心吸附柱中，13000g室温离心半分钟，弃穿透液。
  
• 加0.7mL通用洗柱液，室温离心半分钟，弃穿透液。再加0.3mL通用洗柱液，室温离心半分钟，弃穿透液。
  
• 室温离心半分钟。此步十分重要，否则残留的乙醇会影响RNA的使用。
  
• 将离心吸附柱转移到RNase-free收集管中，加入50～100μL RNA洗脱液，室温放置1～2分钟。
  
• 13000g室温离心半分钟，离心管中溶液即为RNA样品，可以立即使用或存放于-80℃待用。

• RNA完整性的电泳检测：由于粪便RNA含有肠道上皮细胞和肠道细菌的RNA，它们的分子量大小不一，所以电泳时不会形成清晰的条带。
  
• RNA产量产率测定：通过OD260的光吸收可以得出RNA浓度（1 OD260的RNA=40μg/mL），进而计算出RNA的产量（浓度×体积)和产率(RNA产量/粪便的用量)。
  
• RNA纯度测定：无污染的总RNA的OD260/OD280一般在1.8～2.1之间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关)，高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染，但一般不影响RT-PCR等反应。